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Sanger-Methode (Dideoxynucleotide-Sequenzierung)

Eine Technik zur Bestimmung der Basis Sequenz von einer homogenen Polynukleotid, die als Vorlage in einem Replikationssystem fungiert. A kleine Menge von einem bestimmten Dideoxynucleoside-triphosphat gehört zu den vier normale Deoxynucleotide Triphosphate während der Replikation. Kette, die Kündigung tritt ein, wenn eine Dideoxynucleotide integriert ist, die generiert eine beschriftete Polynukleotid deren Kettenlänge, ausgewertet durch Polyacrylamid-Gelelektrophorese, ist bezeichnend für die Entfernung von 5'-Ende der Zündkapsel auf die Position, an der die normalen Nukleotid erfolgt. Nachweisvon der Elektrophorese, die Bands durch eine Beschriftung z. B. 32 P oder, vor kurzem durch einen Fluorophor in die Grundierung (Farbstoff Grundierung Sequenzierung) oder Dideoxynucleotide (Dye Terminator Sequenzierung) integriert sein können. In der Tat, in einer Abwandlung der Dye Terminator-Methode, die Kennzeichnung aller vier Didesoxyribonukleosid mit einem Fluorophore, die auf einer anderen Wellenlänge Genehmigungen die Identifizierung der Basis, die jeder Elektrophorese beendet band innerhalb einer getrennten Mischung aller vier ausgibt (single Lane Sequenzierung).

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